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血清白蛋白的分离纯化及鉴定

血清白蛋白的分离纯化及鉴定
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文章编号 :1000-2243(2005) 05-0691-04血清白蛋白的分离纯化及鉴定

张少权 , 李 昊 , 郭春腾 , 饶平凡

(福州大学生物工程研究所 , 福建 福州   350002)

摘要 :由新鲜驴血浆离心得到的血清经冷冻 , 离心 , 透析 , 0. 22μm 滤膜过滤 , 经过两步 S ource 15Q 离子交换 色谱于 HP LC 进行纯化 , 得到 3个含有驴血清白蛋白的峰 . 经 S DS -PAGE 电泳测定 , 其分子量在 66. 0kDa 左 右 , 纯度达到电泳纯 . 经 PAGE 电泳鉴定 , 均为单一驴血清白蛋白 . 此法步骤简单 , 用血量少 , 适用于实验 室常规分析和研究 .

关键词 :驴 ; 血清白蛋白 ; 阴离子交换色谱 ; HP LC

中图分类号 :Q512文献标识码 :A

Isolation , puri fication and identi fication of donkey serum

ZH ANG Shao -quan , LI Hao , G UO -,

(Institute of Biotechnology , Fuzhou , , , China )

Abstract :D onkey serum albumin from of freezing , centrifugation , di 2 alysis and filtration by 0. 22and purified through tw o steps of anion -ex 2 change LC and three peaks of albumin were obtained finally. The m olecular by S -PAGE was about 66. 0kDa. Its hom ogeneity was als o verified by PAGE. method which just requires a small quantity of donkey blood is applicable for general analysis and research in laboratory.

K eyw ords :donkey ; serum albumin ; anion exchange chromatography ; HP LC

阿胶与人参 、 鹿茸并称 “ 中药三宝” , 药用历史已有 2000多年 . 驴皮是制作阿胶的主要原料 , 提取 驴皮中的总蛋白进行 S DS -PAGE 电泳分析发现 , 除了胶原蛋白外 , 驴血清白蛋白的含量也较高 , 推测 该蛋白可能和阿胶的药理作用有关 , 因此对其进行分离纯化等相关研究就成为很有意义的一个课题 . 从方便性和实用性的角度考虑 , 选择了驴血浆作为分离纯化的原材料 .

血清白蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质 , 约占总量的 60%.它是一种水溶性很强的蛋白 , 结构 稳定 , 能结合多种小分子 , 如脂肪酸 , 胆红素 , 血红素等 , 起维持血液的正常渗透压作用 . 此外白蛋白 还有解毒 、 参与脂类代谢及血浆中微溶物质的运输 、 维持血液酸碱平衡等作用 , 在医学临床及生物领域 有着广泛的应用 [1, 2]. 考虑到血清白蛋白的经济价值和临床应用等 , 其分离纯化的方法被广泛的报道 . 早期的方法如 , Denis 的氯化纳法 (1847年 ) , H ofmeister 的硫酸钠法 (1890年 ) 和 Hermmarsten 的硫酸铵分 级盐析结晶法 (1894年 ) . 从血浆中分离白蛋白的经典方法是 C ohn 的低温乙醇法 (1940年 ) . 1980年 Curling 又提出了色谱法 [3].

相对于大量的牛血清白蛋白 (BS A ) , 人血清白蛋白 (HS A ) 研究文献 , 驴血清白蛋白的分离纯化尚未 见报道 .

1  材料与方法

收稿日期 :2005-01-10

作者简介 :张少权 (1981-) , 男 , 硕士 ; 通讯联系人 :饶平凡 , 教授 .

第 33卷 第 5期 福州大学学报 (自然科学版 ) V ol. 33N o. 5

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